sexta-feira, 6 de setembro de 2013

FIBROSE CÍSTICA

<iframe width="420" height="315" src="//www.youtube.com/embed/qyufeOOaVro" frameborder="0" allowfullscreen></iframe>

quarta-feira, 28 de agosto de 2013

DIAGNÓSTICO DE DOENÇAS GENÉTICAS


DIAGNÓSTICO DE DOENÇAS GENÉTICAS: MÉTODOS DE RASTREAMENTO
Uma ampla variação de técnicas são utilizadas para a identificação de doenças genéticas. Todos os métodos têm vantagens e desvantagens e requerem considerável habilidade e experiência para serem realizados. Não existe uma padronização ou preferência geral por um método, mas os laboratórios devem ser conhecedores das limitações e sensibilidade dos métodos por eles usados.
A apresentação a seguir é uma síntese das diferentes estratégias, baseadas na análise do DNA, utilizadas para o diagnóstico de doenças genéticas.
Doenças Genéticas: Padrões de Herança Simples ou Complexo
  • Autossômicas Recessivas - os genes estão presentes nos autossomas e os indivíduos afetados tem duas cópias do gene mutante. Ex: Fibrose Cística.
  • Autossômicas Dominantes - os genes também estão nos autossomas, mas basta uma cópia do gene mutante para causar a doença. Ex: Doença de Huntington.
  • Ligadas ao Cromossomo X - os genes agem como mutações dominantes no sexo masculino. Ex: Distrofia muscular de Duchenne.
  • Poligênicas ou Multifatoriais- resultam de mutações em genes diferentes ou surgem da interação de fatores ambientais com múltiplos genes. Ex: Doenças cardíacas coronárias, câncer e esquizofrenia.
Aconselhamento Genético
O aconselhamento genético é o conjunto de informações dado à família com relação ao risco de recorrência , prognóstico e possíveis tratamentos de uma determinada doença genética.
Testes Genéticos
  • Citogenético
  • DNA
  • Metabólico
Métodos de Análise do DNA (Diagnóstico Molecular)
As técnicas mais comuns de diagnóstico molecular são:
  • amplificação enzimática do DNA (PCR)
  • digestão da fita de DNA genômico ou produto de PCR com enzimas de restrição
  • separação eletroforética do DNA ou do produto de PCR
  • hibridação do DNA ou fragmentos de PCR com sondas oligonucleotídicas.
Aplicações da PCR
1. A PCR permite a rápida amplificação de um gene específico ou de um exon de um determinado gene como a primeira etapa para rastreamento de mutações não caracterizadas:
  • PCR para amplificações de exons específicos do DNA genômico
  • RT-PCR para análise de transcritos
2. A PCR permite a rápida genotipagem de marcadores polimórficos:
  • Como uma alternativa de RFLP pelo desenho de primers flanqueadores de sítio de restrição polimórfico, permitindo a amplificação da região do polimorfismo e digestão do produto da PCR com a enzima de restrição sítio específica.
  • Pelo desenho de primers de seqüências que flanqueiam repetições em tandem ou seja Short tandem repeat polymorphisms (STRs), conhecidas como microssatélites, que são seqüências curtas de 1-4 nucleotídeos de comprimento, que se repetem diversas vezes em tandem e que geralmente são caracterizadas por muitos alelos.
3. A PCR pode ser usada para ensaio de mutações conhecidas
  • A discriminação alélica pelo tamanho: pequenas deleções ou insersões em alelos que podem ser detectadas por PCR, por exemplo, deleções no alelo mais comum que causa a fibrose cística (DF508)
  • A suscetiblidade a enzima de restrição: mutações que mudam um sítio de restrição podem ser detectadas como descrito anteriormente, pela digestão do produto de PCR com a enzima de restrição específica
4. PCR alelo-específico (teste de ARMS)
  • Mutações conhecidas podem ser identificadas pelo desenho de três primers, um específico para o alelo mutante, o outro específico para o alelo selvagem e o terceiro é específico da região flanqueadora (conservada) do exon e que será o primer que vai encaminhar a amplificação da fita no sentido direto. O desenho é feito de maneira que o primer específico para o alelo mutante termina com a base mutada na extremidade 3’ e o primer específico para o alelo selvagem termina com a base normal em sua extremidade 3’, funcionando como uma sonda alelo específica. Este método é usado para detectar mutações específicas e foi chamado de sistema de amplificação de mutação refretária.
5. A PCR pode ser usada para rastreamento de mutações e polimorfismos de DNA
  • A detecção de variação de seqüências no DNA é importante para a identificação de mutações que causam doenças em um determinado gene, bem como para a detecção de polimorfismos de DNA. Uma vez que uma grande fração das variações genéticas são devido às diferenças produzidas pela mudança de base única na seqüência de DNA, o uso de técnicas capazes de detectar substituições de uma única base quando se procura mutações e seqüências polimórficas foi um avanço tecnológico para a pesquisa destas variações. Alguns destas técnicas de rastreamento são: DGGESSCP, DHPLC.
Cromatografia Líquida Desnaturante de Alta Performance (DHPLC)

DHPLC é uma cromatografia líquida baseada no método de pareamento de íons em fase reversa sob condições desnaturantes. Seu princípio é:
  • formação de heteroduplexes através da hibridação após o aquecimento e esfriamento dos produtos de PCR.
  • separação dos heteroduplexes e homoduplexes sob condições parciais de desnaturação
Método Citogenético
A observação microscópica de cromossomos normais e anormais permitiram a construção de mapas citogenéticos do genoma de muitas espécies. Estes mapas mostram a localização relativa de características morfológicas dos cromossomos (ex; centrômeros, marcadores citogenéticos ou bandas) e lesões cromossômicas visíveis. O conceito de mapa citogenético tem sido estendido para incluir a ordem de seqüências de DNA derivadas de arranjos físicos dos seus sítios de hibridação. O novo método de FISH ( hibridação in situ fluorescente) é o meio mais direto de localizar marcadores moleculares e genéticos no mapa citogenético permitindo a integração entre mapas genéticos e moleculares.
Sondas cosmídeos - sondas de seqüência única, que se ligam em pequenos segmentos de determinados cromossomos, úteis para o estudo de microdeleções.
Painting probes - sondas específicas de regiões muito separadas ao longo de um único cromossomo, dando a ilusão de "pintar" o cromossomo inteiro, usadas para a identificação de material extra (ex: translocação)
                        
Sondas DNA Alfa-Satélite - composto de elementos com seqüências altamente repetitivas encontrados próximos dos centrômeros (ex: duplo sinal significa a presença de dois centrômeros).

Giselda MK Cabello, MSc.
Responsável pelo Projeto Fibrose Cística
Laboratório de Genética Humana
Departamento de Genética/IOC/FIOCRUZ

 

terça-feira, 27 de agosto de 2013

Conscientização sobre Doação de Órgãos , Medula , Plaqueta e Tecidos.



Prezado Parceiro


Ref:  Ação Sócio Ambiental da Secretaria do Verde e Meio Ambiente


A Secretaria do Verde e Meio Ambiente estará promovendo no dia 29 de Setembro de 2013, das 09 as 17 hs, sua 1ª Ação Sócio Ambiental em homenagem ao Aniversário do Parque do Carmo Olavo Egydio Setúbal e entrada da Primavera.

O evento consiste em fornecer gratuitamente para a Comunidade de  todos os Serviços Públicos e Privados necessários para melhor qualidade de vida.Desta forma pretendemos colocar a disposição os seguintes serviços:

Secretaria Municipal do Verde e Meio Ambiente Secretaria Municipal do Desenvolvimento,Trabalho e Empreendedorismo Poupatempo (Documentos/Carteira de Identidade/Carteira de Trabalho)Serviços Médicos,Serviços Odontológicos ,Unicsul, Unicastelo, Cursos e Palestras Orientação Jurídica,Atividades Culturais Atividades Esportivas

Vamos  realizar simultaneamente o evento " Conscientização sobre Doação de Órgãos , Medula , Plaqueta e Tecidos." e para tanto estamos convidando V.Sra  para participar da  1ª reunião para tratar do planejamento do Evento no dia 04/09/13,as 10 hs,nas dependências do Parque do Carmo. Av Afonso Sampaio e Souza 951 Itaquera


Coordenador Cientifico - Cristina Iacovelo Cagliari Conselheira Estadual de Saúde

Jose Carlos Orosco - Conselheiro Estadual da Pessoa com Deficiência - Coordenador de Assuntos  Interdepartamentais do GEDR_BRASIL.


Cassia Barbosa  - Presidente da APARTESP - Associação de Pacientes Renais e Transplantados do Estado de São Paulo

segunda-feira, 22 de julho de 2013

Granulomatose


Os 10 sinais de aviso de Imunodeficiência Primária
1. Oito ou mais novas infecções de ouvido em um ano.
2. Dois ou mais sinusite graves dentro de um ano.
3. Dois ou mais meses sobre antibióticos com pouco efeito.
4. Duas ou mais pneumonias em um ano.
5. A falha de um bebê a ganhar peso ou crescer normalmente.
6. , Pele recorrente profunda ou abscessos de órgãos. 
7. Aftas persistentes na boca ou em outros locais da pele, depois de um ano de idade.
8. Necessidade de antibióticos intravenosos para infecções claras.
9. Duas ou mais infecções profundas, como a meningite, osteomielite, celulite ou sepsis.
10. Uma história familiar de imunodeficiência primária.
A informação acima é da Fundação Jeffrey Modell .
Os pacientes com CGD são propensos para a pneumonia, os nódulos linfáticos aumentados, colite, anemia, abcessos, granulomas do estômago, do esófago ou do tracto urinário e osteomielite, para citar alguns. A maioria dos pacientes CGD são vistos por um imunologista.
Como a CGD diferem de outras imunodeficiências primárias?
CGD é um dos mais de 100 imunodeficiências primárias. Ao contrário de muitos PID, doentes com DGC têm a capacidade de combater o vírus, mas não as infecções bacterianas ou fúngicas. A célula pode engolir o germe, mas o celular não tem o oxigênio explodiu para matar o germe.
Os testes de diagnóstico para CGD
CGD é diagnosticada por um simples exame de sangue, de baixo custo chamado de nitroblue teste de tetrazólio (NBT). Outro teste de diagnóstico usa dihydrorhodamine (DHR). Este método é mais preciso do que o teste de NBT.
O que não é a CGD
Se houver termos como "granulomatosa" "granulomas calcificados" "old granulomas" "hilares calcificação" "resíduos de doença granulomatosa anterior" em um relatório de x-ray, ele sugere que houve uma infecção, provavelmente, muitos anos antes, por um bactérias ou fungos, que tende a formar granulomas, que são um tipo particular de reacção inflamatória. Isto poderia ter sido pneumonia, etc Isso não significa que não há atualmente uma infecção ativa. Isto também não é a doença CGD. Muitas pessoas confundem os dois termos.

segunda-feira, 15 de julho de 2013

Leucemia

<iframe width="420" height="315" src="//www.youtube.com/embed/nXziakTglLU" frameborder="0" allowfullscreen></iframe>

sexta-feira, 12 de julho de 2013

Falência de medula óssea, familiar; BMFF

Falência de medula óssea, familiar; BMFF
Fenótipo Gene Relacionamentos
LocalizaçãoFenótipoFenótipo 
Número MIM
Gene / LocusGene / Locus 
Número MIM
4T12Falência da medula óssea, familiar614675SRP72602122

Sinopse Clínica
TEXTOUm sinal de número (#) é usado com essa entrada porque falência da medula óssea familiar autossômica dominante (BMFF) é causada por mutação heterozigótica no gene SRP72 ( 602.122) no 4T12 cromossômicas.
Características ClínicasKirwan et ai. (2012) relataram uma família em que três irmãos, com idades entre 11 a 14 anos, tinha anemia aplástica precoce ou pancitopenia e sua mãe tinha mielodisplasia. Todos também tiveram surdez nervosa congênita. Não foram tratados pelas anormalidades hematológicas. Em uma segunda família, uma mãe e filha tiveram mielodisplasia adulta. Nem tinha surdez, mas a filha tinha labirintite possível. Nem recebeu tratamento.
HerançaO padrão de transmissão de falência da medula óssea nas famílias relatadas por Kirwan et al.(2012) foi consistente com herança autossômica dominante.
Genética MolecularPor sequenciamento de todo o exome, Kirwan et al. (2012) identificaram uma mutação no gene truncando SRP72 ( 602.122,0001 ) em quatro membros afetados de uma família com anemia / mielodisplasia e surdez congênita aplástica autossômica dominante. Análise deste gene em 96 indivíduos adicionais com insuficiência da medula óssea identificada uma mulher com mielodisplasia, que tinha uma mutação missense heterozigótica (R207H; 602.122,0002 ); sua mãe com mielodisplasia também tinham a mutação. In vitro os estudos de expressão funcionais mostraram que ambas as proteínas mutantes tinham reduzido colocalização com marcadores de ER, em comparação com estirpe selvagem. A mutação truncagem mostrou uma redução acentuada na coprecipitação com ARN 7SL (ver, por exemplo, RN7SL1, 612,177 ), enquanto que a proteína mutante R207H tinha a maior interacção com o RNA 7SL. Estes defeitos foram previstos para interferir com o funcionamento normal da partícula de reconhecimento do sinal, com uma incapacidade para prender tradução citoplasmática ou translocar péptidos adequadamente dentro da célula. No entanto, não está claro como um defeito na translocação da proteína resultar no fenótipo.
Referências
1.Kirwan, M., Walne, AJ, Plagnol, V., Velangi, M., Ho, A., Hossain, U., Vulliamy, T., Dokal, I.Exome seqüenciamento identifica autossômica dominante SRP72 mutações associadas à aplasia familiar e mielodisplasia. Am. J. Hum. Genet. 90:. 888-892, 2012[PubMed: 22541560 , citações relacionadas ] [Texto Completo: Elsevier Science ]

Data de criação:Cassandra L. Kniffin: 6/6/2012
 Editar História:carol: 06/06/2012